O que é matriz biológica?
A matriz biológica é o meio de origem biológica que contém os componentes de interesse em uma análise. Pode incluir células, proteínas, lipídios, metabólitos e outras substâncias capazes de influenciar a preparação da amostra e o resultado analítico.
Na pesquisa biomédica, a matriz pode ser sangue, plasma, soro, urina, saliva, líquido cefalorraquidiano ou tecido. A composição varia conforme a origem da amostra e as condições de coleta.
Em resumo: a matriz biológica é o ambiente da amostra no qual o analito está presente. Seus componentes podem facilitar ou interferir na medição.
Quais são os principais exemplos de matriz biológica?
Cada tipo de matriz biológica apresenta características próprias. Por isso, o mesmo procedimento nem sempre produz resultados comparáveis em materiais diferentes.
- Plasma: fração líquida do sangue coletado com anticoagulante, com proteínas e fatores de coagulação.
- Soro: fração líquida obtida após a coagulação do sangue, com composição diferente da do plasma.
- Urina: fluido com sais, metabólitos e concentração variável de componentes.
- Saliva: fluido com proteínas, enzimas, mucinas e possíveis contaminantes da cavidade oral.
- Líquido cefalorraquidiano: fluido do sistema nervoso central, relevante em investigações neurológicas. Saiba mais sobre o líquido cefalorraquidiano.
- Tecidos e lisados celulares: materiais que podem exigir homogeneização, lise e etapas adicionais de clarificação.
Como a matriz biológica interfere nos resultados laboratoriais?
O chamado efeito de matriz ocorre quando substâncias presentes na amostra alteram a resposta do método analítico. Dependendo da técnica, pode haver supressão ou intensificação do sinal, interferência óptica ou recuperação inadequada do analito.
Em estudos de partículas, proteínas agregadas, lipoproteínas e detritos celulares podem dificultar a interpretação. Também podem aparecer em etapas de isolamento de vesículas extracelulares.
Ponto crítico: detectar partículas em uma matriz biológica não significa identificar automaticamente sua origem ou composição.
Por que a matriz biológica importa no isolamento de vesículas extracelulares?
Plasma, urina e outros biofluidos contêm partículas e moléculas que podem acompanhar as vesículas durante a separação. Esse fenômeno é conhecido como coisolamento.
A cromatografia de exclusão por tamanho (SEC) separa componentes conforme seu comportamento de eluição associado ao tamanho hidrodinâmico. Entretanto, partículas de dimensões semelhantes podem compartilhar frações, o que exige avaliação da pureza.
A preparação deve considerar o biofluido, o volume disponível, a finalidade do isolamento e os testes posteriores. Na caracterização, técnicas como a análise downstream ajudam a verificar atributos relevantes do material obtido.
Como preparar uma matriz biológica para análise?
Não existe um protocolo universal. A preparação depende do tipo de matriz, do analito e da técnica utilizada.
Padronizar a coleta
Registrar o tipo de recipiente, anticoagulante quando aplicável, horário da coleta e condições de transporte para garantir a consistência das amostras biológicas.
Controlar a conservação
Definir a temperatura de armazenamento, o tempo máximo até o processamento e os limites de congelamento e descongelamento para preservar a integridade da amostra.
Remover interferentes quando necessário
Empregar técnicas como centrifugação, filtração ou outros métodos de pré-tratamento validados para reduzir interferências e melhorar a confiabilidade das análises.
Verificar o método
Avaliar parâmetros como recuperação, precisão, especificidade e efeitos de matriz, quando pertinentes, para garantir que o método analítico seja adequado à finalidade do estudo.
Documentar as etapas
Manter registros detalhados dos procedimentos realizados, permitindo a rastreabilidade das amostras, a reprodutibilidade dos ensaios e a comparação dos resultados.
Boa prática: validar a preparação na matriz real de trabalho é mais confiável do que extrapolar resultados obtidos apenas em soluções simples.
Qual é a diferença entre matriz biológica, amostra e analito?
Matriz biológica
A matriz biológica é o meio que contém os componentes da amostra, como proteínas, lipídios, sais e outras substâncias. Exemplos incluem plasma sanguíneo, soro, urina e saliva.
Amostra
A amostra é a porção de material biológico coletada para análise. Por exemplo, uma alíquota de plasma retirada de um paciente para investigação laboratorial.
Analito
O analito é a substância, partícula ou característica que se pretende identificar ou medir. Exemplos incluem glicose, colesterol, proteínas específicas e vesículas extracelulares.