Espectrofotometria: Entenda o Método para Análise da Concentração de Soluções

O que é Espectrofotometria?

A espectrofotometria é uma técnica amplamente utilizada para medir a absorção da luz por uma substância química em solução. O método analisa a intensidade da luz ao atravessar a amostra, fornecendo dados cruciais sobre a concentração da substância presente.

Cada composto químico absorve ou transmite luz em comprimentos de onda específicos. Essa propriedade permite não apenas a identificação de substâncias, mas também a quantificação de suas concentrações.

A espectrofotometria é amplamente utilizada em diversos setores, incluindo:

• Biologia molecular e bioquímica;
• Indústrias farmacêutica e alimentícia;
• Laboratórios clínicos e de pesquisa;
• Controle de qualidade industrial;
• Estudos ambientais.

Como Funciona a Espectrofotometria?

O processo baseia-se na interação entre luz e matéria. A absorção da luz é regida pela Lei de Beer-Lambert, que estabelece uma relação entre a absorbância e a concentração da substância na solução.

Principais Conceitos:

• Transmitância : A fração da luz que atravessa a amostra sem ser absorvida.
• Absorbância : A quantidade de luz absorvida pela substância em solução. Quanto maior a concentração da substância, maior será a absorbância.

A soma da transmitância e da absorbância resulta em 100% da energia luminosa incidente. Se 90% da luz é absorvida, apenas 10% é transmitida.

Espectrofotometria e a Relação com as Cores

A luz é uma forma de radiação eletromagnética que interage de maneira específica com diferentes substâncias. Essa interação determina a cor visível da solução.

As cores percebidas são aquelas que a substância não absorve , mas reflete ou transmite. A seguir, um guia com os comprimentos de onda e suas cores complementares:

O espectrofotômetro é o equipamento utilizado para realizar a análise espectrofotométrica. Ele mede a quantidade de luz absorvida e transmitida por uma amostra em diferentes comprimentos de onda.

Os principais componentes são:

1. Fonte de luz : Emite radiação visível, ultravioleta ou infravermelha.
2. Colimador : Direciona a luz para um feixe paralelo.
3. Monocromador (prisma ou rede de difração) : Separa a luz nos diferentes comprimentos de onda.
4. Fenda seletora : Permite a passagem de apenas um comprimento de onda desejado.
5. Cubeta : Recipiente onde a amostra é colocada para análise.
6. Detector (célula fotoelétrica) : Converte a luz transmitida em um sinal elétrico.
7. Leitor digital : Exibe os valores de absorbância e transmitância.

Cubetas para Espectrofotometria

A cubeta é o recipiente que armazena a solução analisada no espectrofotômetro. Existem diferentes tipos de cubetas, sendo as mais comuns:

• Vidro : Para medições no espectro visível.
• Quartzo : Para análises em ultravioleta (UV), pois o material não absorve radiação UV.
• Acrílico : Opção descartável, usada em testes rápidos e menos exigentes.

Cuidados no Uso de Cubetas:

• Manter a cubeta sempre limpa para evitar interferências nas leituras.
• Não tocar na superfície óptica com os dedos.
• Evitar o uso de estufas ou chamas para secagem, pois isso pode alterar o caminho óptico.

Calibração com Padrão Branco

Antes de realizar qualquer análise, o espectrofotômetro deve ser calibrado com uma solução branco , que contém todos os reagentes exceto a amostra. Isso permite eliminar interferências indesejadas e garantir medições precisas.

Considerações Finais

A espectrofotometria é um método essencial para análises químicas e biológicas. Compreender seus princípios, componentes e técnicas é fundamental para obter resultados precisos e confiáveis. O uso correto das cubetas e a calibração adequada do equipamento são fatores determinantes para a qualidade das medições.

Referências

1. Skoog, D. A., Holler, F. J., & Crouch, S. R. (2018). " Princípios de Análise Instrumental ". Cengage Learning.
2. Harris, D. C. (2020). " Análise Química Quantitativa ". LTC.
3. 
   

Perguntas Frequentes Sobre Espectrofotometria