Exossomos são vesículas extracelulares (EVs) com diâmetro entre 30 e 220 nm, secretadas por praticamente todos os tipos celulares. Eles carregam proteínas, RNA e lipídeos que refletem o estado da célula de origem, o que os torna altamente relevantes para diagnóstico, pesquisa translacional e produção de terapias baseadas em EVs. Para qualquer dessas aplicações, a qualidade do isolamento é determinante: contaminação proteica compromete análises ômicas, reduz a integridade das partículas e inviabiliza o uso em downstream terapêutico.
A Dafratec representa no Brasil a linha EXODUS, desenvolvida pela Exodus Bio, com tecnologia proprietária de nanofiltração ultrassônica publicada originalmente na Nature Methods (2021, 18(2):212–218).
Os sistemas EXODUS — H-600 para laboratório e T-2800 para escala industrial — cobrem todo o pipeline upstream de EVs, da pesquisa básica à produção GMP.
O Desafio do Isolamento de Exossomos de Alta Pureza
Os métodos tradicionais de isolamento de exossomos apresentam limitações significativas para aplicações que exigem alta pureza e reprodutibilidade. A ultracentrifugação demora até 3 horas e resulta em pureza baixa com contaminação proteica expressiva. Kits de precipitação por polietileno glicol (PEG) chegam a 12 horas de processamento com performance semelhante. Nenhum deles escala facilmente para volumes industriais nem oferece controle batch-to-batch adequado.
Comparativo publicado em Nature Methods (2021) demonstrou que o EXODUS processa 10 mL de urina em 10 minutos, contra 3 horas da ultracentrifugação e 12 horas do PEG — com pureza ~99% e rendimento ~90%.
| Método | Tempo (10 mL urina) | Remoção de proteínas | Escala |
|---|---|---|---|
| Ultracentrifugação (UC) | ~3 horas | Baixa | Limitada |
| Precipitação PEG | ~12 horas | Baixa | Limitada |
| EXODUS H-600 | ~10 minutos | >99% | Laboratório / R&D |
| EXODUS T-2800 | 1–2 L/h | >99% | GMP / Industrial |
Fonte: Nature Methods, 2021, 18(2):212–218 (H-600) e datasheet EXODUS T-2800.
Princípio de Nanofiltração Ultrassônica EXODUS
Ambos os sistemas utilizam a mesma plataforma tecnológica: um sistema de nanofiltração por dupla membrana que combina oscilação por pressão negativa (NPO) e oscilações harmônicas ultrassônicas acopladas (HO). Esses dois mecanismos atuam sobre a membrana nanoporosa para remover rapidamente ácidos nucleicos livres e proteínas contaminantes, resultando no isolamento de exossomos ultrapuros com integridade estrutural preservada.
O processo é label-free: utiliza apenas tampão PBS como reagente. Não há anticorpos, polímeros de precipitação ou marcadores. Isso simplifica o protocolo, reduz variáveis e torna as EVs isoladas diretamente compatíveis com RNA-seq, proteômica, drug loading e aplicações terapêuticas.
Apenas PBS como tampão. Sem anticorpos, polímeros ou marcadores, isolamento label-free do início ao fim, compatível com qualquer análise downstream.
Escolha o Sistema Certo para Sua Aplicação
A família EXODUS cobre dois estágios distintos do pipeline de EVs:
- Desenvolvimento em bancada e
- Produção em escala.
Os dois sistemas compartilham a mesma tecnologia de isolamento, o que facilita a transição de protocolos do laboratório para a manufatura.
EXODUS H-600 — Isolamento Automático de Exossomos para Pesquisa e R&D
O H-600 é um sistema compacto e autônomo voltado para laboratórios de pesquisa, grupos de R&D e estudos de desenvolvimento inicial. Opera sem necessidade de computador adicional, com interface touchscreen de 10,4" e esterilização UV interna automática.
- Volumes de amostra: 10 µL a 250 mL
- Velocidade máxima: 200 mL/h
- Pureza: ~99% | Rendimento: ~90%
- Tipos de amostra: plasma, urina, saliva, lágrimas, humor aquoso, líquido cefalorraquidiano, fluido sinovial, meio de cultura celular, meio bacteriano, vesículas derivadas de células, tecido, material vegetal
- Reagente único: tampão PBS
- Controle de temperatura: 2–8°C
- Armazenamento de dados: até 20.000 isolamentos
- Dimensões: 535 × 510 × 475 mm | Peso: 40 kg
Indicado para: diagnóstico precoce, pesquisa de biomarcadores, análises proteômicas e transcriptômicas, estudos de drug delivery em fase inicial e qualquer aplicação que requeira processamento rápido de volumes laboratoriais com alta pureza.
EXODUS T-2800 — Isolamento em Escala Industrial com Conformidade GMP
O T-2800 é um sistema "three-in-one" que integra pré-processamento de amostra, isolamento de exossomos e coleta automática em um único equipamento. Foi projetado para a produção industrial de EVs terapêuticos, com conformidade GMP e rastreabilidade 21 CFR Part 11.
- Volume de processamento: 1–10 L
- Velocidade: 1–2 L/h
- Fator de concentração: ≥100×, ajustável
- Remoção de proteínas: >99%
- Ratio partícula/proteína: >3×10⁸ partículas/µg proteína
- Concentração final: 1×10¹¹–10¹² partículas/mL
- Ressuspensão: PBS ou solução salina, ajustável para downstream
- Conformidade: GMP + 21 CFR Part 11
- Consumíveis: uso único, estéreis, livres de endotoxinas, adequados para ambientes Classe C ou C+A
- Controle de temperatura: 2–8°C em posições de amostra, tampão e coleta
- Dimensões: 820 × 500 × 685 mm | Peso: ≤90 kg
Em aplicação com células-tronco mesenquimais (10 L), o T-2800 atingiu concentração de 4,4×10¹¹ partículas/mL, pureza vesicular de 93,41% e taxa de remoção proteica de 99,8%, com distribuição de tamanho entre 30 e 220 nm confirmada por TEM.
Aplicações do Isolamento de Exossomos e Vesículas Extracelulares
A tecnologia EXODUS é aplicada em quatro frentes principais de pesquisa e desenvolvimento com EVs. Em cada uma delas, a alta pureza e a integridade das partículas isoladas são requisitos críticos para a validade dos resultados.
- Diagnóstico precoce e biomarcadores líquidos — isolamento de EVs a partir de plasma, urina, lágrimas e saliva para identificação de marcadores moleculares associados a doenças oncológicas, neurológicas e inflamatórias.
- Drug delivery via EVs — produção de exossomos de alta pureza para carregamento de moléculas terapêuticas (siRNA, mRNA, fármacos de pequeno peso molecular), aproveitando a capacidade natural das EVs de atravessar barreiras biológicas.
- Medicina regenerativa — isolamento em larga escala de EVs derivadas de células-tronco mesenquimais (MSC) para aplicações terapêuticas em fibrose, doenças oculares e regeneração tecidual.
- Pesquisa translacional — análises proteômicas, transcriptômicas e metabolômicas de EVs plasmáticas, urinárias e lacrimais para transição de descobertas laboratoriais para aplicações clínicas.
Validado pela Comunidade Científica Internacional
A tecnologia EXODUS foi descrita originalmente em artigo publicado na Nature Methods (IF 47,990), o periódico de maior impacto na área de métodos em ciências da vida. Desde então, o sistema foi utilizado em mais de 20 estudos publicados em journals de alto impacto, cobrindo aplicações que vão de diagnóstico molecular a terapias com células-tronco.
- Nature Methods, 2021 — "Exosome detection via the ultrafast-isolation system: EXODUS" (IF 47,990)
- PNAS, 2021 — "The genetic source tracking of human urinary exosomes" (IF 12,779)
- ACS Nano, 2022 — "Discovering the Secret of Diseases by Integrated Tear Exosomes Analysis via Rapid-isolation System: iTEARS" (IF 18,027)
- Science Advances, 2023 — "Interaction network of extracellular vesicles building universal analysis via eye tears: iNEBULA" (IF 14,980)
- ACS Nano, 2023 — "Isolation of small extracellular vesicles from a drop of plasma via EXODUS and their fingerprint proteomics profiling by MALDI-TOF MS" (IF 18,027)
- Clinical and Translational Medicine, 2022 — "Transcriptomic and metabolomic analysis of plasma exosomes" (IF 10,600)
Fale com um Especialista em Isolamento de Exossomos
A equipe técnica da Dafratec pode indicar o sistema mais adequado para sua aplicação, seja em laboratório de pesquisa ou em linha de produção GMP. Entre em contato para mais informações.
Clique aqui para falar com nossa equipe.
Perguntas Frequentes sobre Isolamento e Purificação de Exossomos
O que diferencia o EXODUS da ultracentrifugação?
A ultracentrifugação demora entre 2 e 3 horas, resulta em contaminação proteica elevada e não oferece controle batch-to-batch adequado. O EXODUS processa a mesma amostra em minutos com pureza superior a 99% e rendimento de aproximadamente 90%, sem necessidade de operador especializado durante o processo.
O sistema EXODUS é label-free? Quais reagentes são necessários?
Sim. O único reagente necessário é o tampão PBS. Não há anticorpos, polímeros de precipitação nem marcadores fluorescentes. Isso reduz variáveis no protocolo e mantém as EVs isoladas compatíveis com qualquer análise downstream — proteômica, RNA-seq, drug loading ou uso terapêutico.
Quais tipos de amostras são compatíveis com o H-600?
Plasma, urina, saliva, lágrimas, humor aquoso, líquido cefalorraquidiano (LCR), fluido sinovial, meio de cultura celular, meio de cultura bacteriana, vesículas derivadas de células, tecido e material vegetal. Os volumes variam por tipo de amostra — de 5 µL (lágrimas, humor aquoso) até 250 mL (urina, meio de cultura celular).
Qual é a diferença entre o H-600 e o T-2800?
O H-600 é destinado a laboratórios de pesquisa e R&D, processando volumes de 10 µL a 250 mL com velocidade máxima de 200 mL/h. O T-2800 é voltado para manufatura em escala industrial, processando de 1 a 10 L com velocidade de 1–2 L/h, conformidade GMP e rastreabilidade 21 CFR Part 11. Os dois compartilham a mesma tecnologia de isolamento, o que facilita a transferência de protocolos entre as plataformas.
O T-2800 atende requisitos regulatórios para produção terapêutica?
Sim. O T-2800 foi desenvolvido para ambientes de manufatura GMP. O sistema é compatível com 21 CFR Part 11 para rastreabilidade eletrônica, utiliza consumíveis de uso único estéreis e livres de endotoxinas, e opera em ambientes Classe C ou C+A. Os exossomos isolados são estéreis e atendem os limites de segurança estabelecidos para aplicações terapêuticas downstream.
Como é garantida a reprodutibilidade entre lotes no T-2800?
O T-2800 opera com fluxo de trabalho totalmente automatizado e monitoramento em tempo real de todo o processo. Dados de linearidade publicados no datasheet do equipamento demonstram relação linear entre volume de amostra e total de partículas (R²=0,97) e total de proteína (R²=0,99) em volumes de 0,5 a 10 L, com ratio partícula/proteína estável ao longo de todos os volumes testados.
A tecnologia EXODUS tem respaldo em publicações científicas?
Sim. O princípio de isolamento foi publicado originalmente na Nature Methods em 2021 (18(2):212–218, IF 47,990). Desde então, o sistema foi utilizado em mais de 20 estudos publicados em journals como ACS Nano, Science Advances, PNAS, Clinical and Translational Medicine e Biosensors & Bioelectronics, cobrindo aplicações em diagnóstico, metabolômica, proteômica e terapias com células-tronco.
É possível usar o EXODUS para produção de exossomos de células-tronco mesenquimais (MSC)?
Sim. O T-2800 foi validado em aplicação com MSC em volume de 10 L, atingindo concentração de 4,4×10¹¹ partículas/mL, pureza vesicular de 93,41% e taxa de remoção proteica de 99,8%. Os marcadores exossomais CD9, CD63 e CD81 foram confirmados por citometria de fluxo, e a distribuição de tamanho entre 30 e 220 nm foi verificada por TEM.
Onde posso adquirir os sistemas EXODUS no Brasil?
A Dafratec é o representante oficial da linha EXODUS no Brasil. Entre em contato com nossa equipe técnica para cotação, informações sobre consumíveis, demonstração ou suporte pós-venda.
